体外培养贴壁细胞重要的生长特点有:贴附和伸展以及接触抑制和生长的密度限制。贴附并伸展,是多数体外培养细胞的基木生长特点。虽然血细胞如淋巴细,胞在体内并尤聚集的倾向并在体外可于悬浮状态中生长,但是大多数的哺乳动物细胞在体内和体外均附着于一定的底物而生长,在体外时这些底物可以是其他细胞、胶原、玻璃或塑料等。
培养细胞在木贴附于底物之前一般均似球体样;当与底物贴附后,细胞将逐渐伸展而形成一定的形 态,呈成纤维细胞样或上皮细胞样等。细胞附着于底物时并非一-种需要能量的过程,一般认为与电荷有关。据资料记载,37°C时在2min内细胞之间即可形成键,该键可对0. 01%胰蛋白酶起作用且仅发生于细胞之间,而细胞与底物之间则无; 8 min后才有稳定的键形成。
2、贴壁细胞如何分离下来?
如果把贴壁的细胞洗下来常用的办法就是加入胰蛋白酶消化,37°C环境下放置3~5min便可,但是残留培养瓶内的胰蛋白酶对细胞有毒性作用,所以都会添加低浓度的以中和胰蛋白酶的。用超声的办法也可以把细胞分离下来,但是要注意超声的频率不能太大,而且细胞很娇嫩,超声会导致细胞的。这是由细胞的性质特点决定的。