点击图片查看原图每批试剂需做验证检验：向一份100mL无菌水样中接种含有粪大肠菌的质控样标准菌株，按照上述定量检测步骤操作观察结果，看结果是否在其范围内。
9 注意事项
9.1 如果水样品有背景颜色，需做一个空白试验，与标准检测结果相比较。
9.2 只可使用灭菌水，不含缓冲液的水，不含氧化剂的水进行样品稀释。
9.3 此法所用试剂只用于常规水样，不可用于浓缩水样。
9.4 如水样中含有过多的氯，则加入试剂可能显蓝光，则该水样不可用此方法。
9.5 此法无需在无菌室中进行，但操作过程因避免微生物污染。
9.6 检测使用过的定量盘应灭菌后弃去。把约30个定量盘放入防爆袋中，用绳子松松的扎住袋口，放入高压蒸汽灭菌锅中，121℃高压灭菌20min后取出，在防爆袋上注明“生物垃圾已灭菌”方可弃去。
程控定量封口机维修保养细则及清洁实施方案
酶底物法避免了传统检测方法中实际操作繁杂、费时费力、实验环境标准高的缺陷，是现阶段在实验室中用来检测大肠菌群的常见方法。程控定量封口机在酶底物法检测中扮演着重要辅助角色，，所以我们在日常操作时要注意对其进行保养与清洁，下面就和大家分享一下程控定量封口机的维修保养细则与清洁实施方案。
程控定量封口机维修保养细则
1、实际操作技术人员经培训学习后方可使用仪器，并严格遵循培训学习与设备说明书的相关标准，以免影响检测结果的准确性，甚至对人员和设备造成损害。
2、将仪器放置在干燥通风的环境中，远离装有水、溶液等液体的玻璃器皿，防止仪器内部进水以及零部件出现锈蚀等情况。
3、禁止将定量检测孔板以外的物品推入程控定量封口机。
4、使用仪器过程中，应注意衣服、头发、手指等远离进口，如果不小心被卷入封口机，应立即按下仪器进口处的反转按钮。此外，如果放入检测孔板时托盘导槽未放平，也需按下反转按钮，需要注意的是，如果橡胶垫已经进入仪器，请不要再进行反转操作。
5、如果有多个待封口的检测孔板，可将多个胶托依次连续放入仪器进行封口。
6、定量孔板封口完毕后，应先关闭设备电源开关，然后再拔掉电源插头。
7、若仪器出现问题故障无法正常操作使用时，应马上停止任何动作并关闭设备电源，然后联系厂家进行售后服务，切勿私自拆卸机器。
滤膜法(MF，membranefilter)滤膜法：是目前为流行的检测水中大肠群的方法。滤膜法的具体步骤是首先将一定量的水体样本注入0.45μm的滤膜过滤，经过抽滤，水中的细菌则被留在滤膜上，将滤膜贴于品红亚硫酸钠培养基上培养24h，温度为恒温37℃，这使得菌群因发酵乳糖而使得滤膜出现紫红色，通过计算滤膜上的菌落进而计算出单位样本中的大肠的数量。
用ISO9308－1规定的滤膜法测定水中大肠回收率均值为94.7%，批内变异系数小于10%，检出限为500mL水样可检出1个CFU。该方法费用较低、原理简单、利于推广，但检测时间相对较长、步骤繁琐、干扰因素多，不适于大量样品的分析，无法满足污染物品快速检测需求。
大肠的快速检测方法
1）分子生物学的快速检测方法：在分子的水平上通过研究生物大分子如核酸、蛋白质的结构来检测大肠。常见方法如下。
A：PCR检测技术聚合酶链式反应简称PCR (polymerasechainreaction)，是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，扩增的一个周期由高温变性、低温退火、适温延伸等几步反应组成，反复循环，使目的DNA得以迅速扩增，2～4min即可完成一个循环，2～3h就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。大肠的检测可采用PCR技术。通过PCR扩增UidA能够检测大肠和志贺氏菌。
B：基因芯片技术：基因芯片(genechip)技术是建立在基因探针和杂交测序技术上的一种快速的核酸序列分析手段。它将各种基因寡核苷酸点样于芯片表面，微生物样品DNA经PCR扩增后制备荧光标记探针，然后再与芯片上寡核苷酸点杂交，后通过检测杂交信号的强度及分布确定检测样品中特定微生物的存在与丰度。研发了检测大肠O157∶H7的芯片，并结合使用生物传感器，使得检测限降低到6×103CFU/mL。
